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單克隆抗體制備的基本方法

抗體是機體在抗原刺激下產(chǎn)生的能與該抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白。常規(guī)的抗體制備是通過動物免疫并采集抗血清的方法產(chǎn)生的，因而抗血清通常含有針對其他無關(guān)抗原的抗體和血清中其他蛋白質(zhì)成分。一般的抗原分子大多含有多個不同的抗原決定簇，所以常規(guī)抗體也是針對多個不同抗原決定簇抗體的混合物。即使是針對同一抗原決定簇的常規(guī)血清抗體，仍是由不同B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的異質(zhì)的抗體組成。單克隆抗體制備的基本方法：對抗原的要求是純度越高越好，尤其是初次免疫所用的抗原。如為細(xì)胞抗原，可取1×107個細(xì)胞作腹腔免...

單克隆抗體制備是一種均一的免疫球蛋白分子

單克隆抗體制備與多克隆抗體主要的區(qū)別是MAb為單一種B細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的一種均一的免疫球蛋白分子。所以MAb是B細(xì)胞克隆的標(biāo)志，是一種*型的抗體，它的特異性是針對一個抗原決定簇的。制備單克隆抗體不能用化學(xué)分離的方法從多克隆抗體中去分離純化得到它，而是用分離產(chǎn)生抗體的B細(xì)胞克隆的方法得到它。單克隆抗體制備原理：常用的單克隆抗體是小鼠的單抗，此外也有大鼠的和人源的單抗。人源單抗制備比較復(fù)雜。小鼠單抗的制備通常是使用Balb/c小鼠的B細(xì)胞和它的骨髓瘤細(xì)胞。大鼠的單抗制備通常用Lou...

技術(shù) | 原核蛋白表達系統(tǒng)

關(guān)于細(xì)菌表達——由于其性質(zhì)，細(xì)菌表達系統(tǒng)是一種理想的蛋白質(zhì)表達系統(tǒng)。它通常是生產(chǎn)重組蛋白和抗體的。到目前為止，許多細(xì)菌已經(jīng)被很好地研究。在大量細(xì)菌中，大腸桿菌和枯草芽孢桿菌細(xì)胞系是**的重組蛋白表達宿主。它們在適宜條件下以極低的成本快速復(fù)制，而表達水平高，這種特性使其成為大規(guī)模生產(chǎn)的有效和經(jīng)濟的方式。他們的基因組已*測序，遺傳背景和代謝途徑****。另外，由于結(jié)構(gòu)簡單，細(xì)菌比真核生物更容易轉(zhuǎn)染。這些期望的特征使表達過程更容易和更快速。但在某些方面，優(yōu)勢也是不利的。可以在細(xì)菌中...

怎么確定大腸桿菌被噬菌體侵染了呢？

噬菌體（phage）是侵襲細(xì)菌的病毒，也是賦予宿主菌生物學(xué)性狀的遺傳物質(zhì)。噬菌體必須在活菌內(nèi)寄生，有嚴(yán)格的宿主特異性，其取決于噬菌體吸附器官和受體菌表面受體的分子結(jié)構(gòu)和互補性。噬菌體是病毒中尤為普遍和分布廣泛的群體。通常在一些充滿細(xì)菌群落的地方，如：泥土、動物的腸道里，都可以找到噬菌體。噬菌體分兩種溫和噬菌體和毒性噬菌體前者不會讓大腸桿菌死亡但是它的基因會整合到大腸桿菌中做PCR檢測一下基因可以確定后者直接讓coil.死亡平板涂布培養(yǎng)板子上會形成噬斑（plaque）可作為判定...

艾柏森免疫原性評價

在臨床前和臨床試驗中評價免疫原性是生物技術(shù)藥物申請臨床試驗和注冊的重要內(nèi)容。艾柏森生物遵照FDA和EMA的指導(dǎo)原則開發(fā)了SensitiveImmunogenicityAssessmentTechnology®(SIAT)技術(shù)評價藥物的免疫原性，包括體內(nèi)研究、離體研究、體外研究及生物信息學(xué)研究方法，可提供經(jīng)驗證的檢測方法、類定量描述藥物誘導(dǎo)的抗體反應(yīng)水平（滴度）、抗體的特性檢測、抗體產(chǎn)生對療效、毒性和藥動學(xué)的影響等內(nèi)容，并預(yù)測在人體內(nèi)潛在的免疫原性強弱，為生物技術(shù)藥物的...

安諾倫代理VMRD品牌

VMRD(VeterinaryMedicalResearch&Development)公司是1981年由D.ScottAdams，DVM，PhD創(chuàng)立的，公司位于美國華盛頓，其產(chǎn)品廣銷國內(nèi)外，是一家專門從事開發(fā)和制造獸醫(yī)診斷檢測試劑盒和相關(guān)試劑的公司，提供的產(chǎn)品主要包括診斷試劑盒，熒光試劑盒，抗體，免疫試劑盒等，公司的理念是為客戶提供高質(zhì)量、高效率的產(chǎn)品和服務(wù)，在這樣的理念支撐下公司對動物生產(chǎn)者，獸醫(yī)疫苗制造商，政府機構(gòu)，制藥公司和獸醫(yī)工作者在提高動物健康方面產(chǎn)生了深遠(yuǎn)的影響。...

抗體&蛋白純化服務(wù)

蛋白純化是利用不同蛋白間內(nèi)在的相似性與差異，利用各種蛋白間的相似性來除去非蛋白物質(zhì)的污染，而利用各蛋白質(zhì)的差異將目的蛋白從其他蛋白中純化出來。每種蛋白間的大小、形狀、電荷、疏水性、溶解度和生物學(xué)活性都會有差異，利用這些差異可將蛋白從混合物如大腸桿菌裂解物中提取出來得到重組蛋白。艾柏森生物可以提供大規(guī)模蛋白純化、融合標(biāo)簽蛋白純化、無標(biāo)簽蛋白純化等多種蛋白純化技術(shù)服務(wù)。艾柏森生物蛋白純化服務(wù)包括：1.抗體純化（ProteinA/G）2.工業(yè)級別大規(guī)模純化服務(wù)3.膜蛋白純化服務(wù)4....

大腸桿菌在表達蛋白過程中越來越少？

大腸桿菌表達系統(tǒng)是目前應(yīng)用*泛地蛋白表達系統(tǒng)。它具有：遺傳背景清楚；易于培養(yǎng)和控制；轉(zhuǎn)化操作簡單；表達水平高；成本低；周期短等特點。同時是常用也是經(jīng)濟實惠的蛋白表達系統(tǒng)，在基因表達技術(shù)中發(fā)展最早。主要可能有兩種原因，一種是大腸在加入IPTG等誘導(dǎo)劑后大腸停止生長或者裂解，這時候我們要考慮蛋白本身對該菌是有一定毒性的，這時候我們可以選擇一些采用嚴(yán)緊控制的宿主菌株，比如帶有pLysS的菌株。另外一種原因就是很令人頭疼的了，當(dāng)我們發(fā)現(xiàn)出現(xiàn)大面積搖瓶中細(xì)菌量逐漸降低甚至培養(yǎng)基回復(fù)到澄...